例先天畸形新生儿的细胞遗传学分析

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作者：王红英、李海波、何亚香、洪礼仪、邵雪君、薛永权

选自：中华医学遗传学杂志,,36(01):-

染色体畸变是先天畸形的常见原因，在新生儿中发病率为0.5%～1.0%[1,2]，是引起儿童残疾甚至死亡的重要原因。我们分析了例先天畸形新生儿的外周血淋巴细胞的染色体核型，探讨二者之间的关系，现将结果报告如下。

1　对象与方法

1.1　对象

年1月至年6月期间在医院治疗的例先天畸形新生儿(男例，女例)，年龄出生1h至30天，包含特殊面容(眼距宽﹑耳位低﹑眼裂小﹑小头畸形等)、先天性心脏病(法洛氏四联症、室缺、房缺、动脉导管未闭)、出生低体重、先天性消化道畸形(巨结肠、肛门闭锁、胆道闭锁等)、多发畸形、外生殖器异常、猫叫样哭声、四肢水肿、四肢发育异常、颈蹼、唇腭裂等。

1.2　方法

将外周血无菌接种于5mL自制的淋巴细胞培养液中，37℃培养72h，于终止培养前2～4h加入秋水酰胺，终浓度为0.1μg/mL。按常规方法制备染色体，G显带，核型分析采用OLYNPUSCX41显微镜下人工分析，每例分析20个中期分裂相，嵌合体者加倍计数。核型异常按《人类细胞遗传学国际命名体制(ISCN)()》的有关规定描述。

2　结果

2.1　异常核型患儿主要临床体征

例核型异常新生儿经体格检查、超声及颅脑CT检查发现，临床表型主要表现为特殊面容(眼距宽、耳位低、眼裂小、小头畸形等)例次(95.1%)、先天性心脏病(法洛氏四联症、主动脉导管未闭、卵圆孔未闭、室间隔缺损等)例次(63.8%)、出生低体重(g)78例次(42.2%)、先天性消化道畸形(巨结肠、肛门闭锁、胆道闭锁等)26例次(14.1%)、多发畸形67例次(36.1%)、外生殖器异常9例次(4.9%)、猫叫样哭声4例次(4.2%)、四肢水肿5例次(2.7%)、四肢发育异常9例次(4.9%)、颈蹼5例次(2.7%)、唇腭裂6例次(3.8%)。

2.2　异常核型类型

在例先天畸形新生儿中，共检出例28种异常核型，异常率为36.6%。其中三体核型例占81.1%，罗伯逊易位13例，占7.0%，缺失10例占5.4%，单体型4例，占2.2%，平衡易位4例，占2.2%，末端增加2例，倒位和重复各1例，核型分布及其主要临床表征见表1。

表1例先天畸形新生儿的异常核型类型及主要临床表型

2.3　17例易位核型家系染色体追踪

17例患儿的易位核型(平衡易位4例，罗氏易位13例，见表1)，其中4例为新发突变，13例遗传自亲代。患儿平衡易位核型有3例为新发突变，1例46，XY，t(3；11)(q13；p15)来源于父亲。罗伯逊易位核型中2例45，XX，Rob(13；15)患儿的母亲具有相同核型，9例46，XX(XY)，＋Rob(D；21)的先天愚型患儿，1例父母染色体正常，8例患儿的异常染色体均来自于母亲，核型为45，XX，Rob(D；21)；2例46，XX(XY)，＋Rob(21；21)先天愚型患儿，其母亲核型均为45，XX，Rob(21；21)。

3　讨论

先天畸形是最重要的一类出生缺陷，其病因复杂，种类繁多，目前缺乏有效的治疗方法，是导致婴幼儿死亡和残疾的重要原因。我国近年来的研究显示，畸形新生儿的染色体异常率约为20.1%～62.4%[3,4,5]，我们在例先天畸形新生儿中检出异常核型例，异常率为36.6%，涉及2、3、5、6、8、9、10、11、13、14、15、18、21、22、X、Y共16条染色体、28种异常核型。提示染色体异常是造成新生儿先天异常的最重要原因之一。

在本研究中，异常核型以三体型最多见，共例(81.1%)，其中主要为21三体，共例，其次为18三体4例，＋8、＋13、＋20和＋X各1例。临床资料显示，21三体患儿除愚型面容和先天性心脏病等经典体征外，消化道畸形也是一个重要表型，主要为先天性肛门闭锁和肠畸形。18三体是仅次于先天愚型的染色体三体征，4例患儿均表现为出生低体重、眼裂小﹑眼距宽﹑下颌短等，并有先天性心脏病和多发畸形，均于出生后6个月内夭折。对于这类异常，除采用血清生化指标筛查及B超检查等手段外，对高危孕妇应尽可能行羊水染色体核型分析或基于高通量测序技术的胎儿非整倍体筛查技术进行预防。

本研究中我们发现染色体的部分缺失或增加患儿共12例，占所有畸形胎儿的2.4%。其中缺失10例，端粒区增加2例。共发现5p缺失综合征4例，3例5p12-15片段缺失，1例45，XX，der(5；21)(p13；q22)，－21。5p15是喉软化症的相关基因所在区段[6,7]，故患儿表现猫叫哭声等典型临床效应。本组共发现3例del(18)(q22→qter)，患儿面部特征与Pitt-Hopkins综合征的临床表现相符。Kato等[8]发现，Pitt-Hopkins综合征相关转录因子4基因和甲基CpG结合域蛋白2(MBD2)基因均位于18q21.2-q21.33。因此，我们高度怀疑此3例患儿与这些基因有关。其余3例涉及4、9、10号染色体短臂部分缺失，临床均表现外观畸形、先天性心脏病及外生殖器异常等。其中10号染色体的缺失区域为p11→pter。有研究者认为该区域存在控制指(趾)发育的基因[9]。

在17例相互易位型核型中，包含平衡易位4例，罗伯逊易位13例。以往认为平衡易位由于没有基因的增减，故不表现临床效应，但本文4例均有典型临床症状，推测可能是易位断裂点存在染色体微小缺失和(或)重复，或断裂发生在与表型密切相关重要基因上，导致基因功能异常，以及基因的位置效应造成的表达异常[10]。在对易位核型患儿的家系调查中，我们发现17例相互易位核型患者，13例异常染色体来自于亲代传递，尤其是罗伯逊易位，几乎均来源于亲代，其母亲则均有多次流产史。可见，临床上对于有多次流产史、染色体异常家族史的孕妇应进一步加强产前筛查和产前诊断，以早期诊断胎儿染色体异常，避免或减少染色体病患儿的出生；另一方面，应追溯患儿异常染色体的来源，并进行后续生育指导。

我们在例异常核型中，共发现性染色体异常6例，具体包括47，XXX1例，46，XY，inv(Y)(p11q11)1例，45，X4例。4例患儿均出现了手足背及双下肢淋巴性水肿，其中3例有颈蹼，1例有先天性心脏病和脚趾甲缺如。合并inv(Y)的21三体核型患儿，除典型的先天愚型表型外，同时出现了阴茎短小，性腺发育不良等体征。inv(Y)以往亦被视为染色体多态性，但有文献报道[11,12,13]认为Y染色体倒位可能引起局部基因的丢失，从而影响男性性腺发育，导致性腺发育不良﹑不育等异常。性染色体异常患者在新生儿期一般比较隐蔽，不易发现，但在青春期发现有身材矮小、性腺发育不良等临床症状往往失去了最佳治疗时机。因此临床上对于手足背淋巴性水肿、颈蹼、尿道下裂、外生殖器异常等异常体征的新生儿应引起重视。

综上所述，核型分析是诊断新生儿染色体病的主要方法。对于先天畸形的新生儿，应尽早行染色体核型分析，同时在孕早期开展优生优育健康宣教，并提供产前遗传学诊断，以减少出生缺陷的发生、降低围产儿和婴儿病死率。

利益冲突

利益冲突　无

参考文献：略